Coombs Test – direkte og indirekte Coombs Test

Biologi pædagogiske videoer

sidst opdateret den 4.februar 2021 af Sagar Aryal

  • Coombs test er en direkte agglutinationsreaktion, mere almindeligt kendt som antiglobulintest.
  • det blev opdaget af Coombs, Mourant og Race i 1945 oprindeligt til påvisning af ufuldstændige anti-Rh antistoffer.
  • i testen agglutinerer ufuldstændige antistoffer ikke erythrocytter. Ufuldstændigt antistof antiglobulin belægger overfladen af erythrocytter, men forårsager ingen agglutination.
  • når sådanne erythrocytter behandles med antiglobulin eller Coombs’ serum, agglutineres cellerne.
  • Coombs’ Serum eller Coombs reagens er et specielt serum fra en kanin eller et andet dyr, der tidligere er immuniseret med oprenset humant globulin til fremstilling af antistoffer rettet mod IgG og komplement (f.eks. kanin antiserum mod human globulin).
  • det bruges i de direkte og indirekte Coombs test og kaldes også antihuman globulin.

mål for Coombs Test

at detektere røde blodlegemer sensibiliseret med IgG alloantistoffer, IgG autoantistoffer eller komplementkomponenter.

princippet om Coombs Test

under visse betingelser, komplementproteiner eller mere almindeligt, ufuldstændige antistoffer (IgG) binder sig til røde cellemembran af Fab-delen af immunoglobulinet. Disse celler siges at være sensibiliserede. Sensibilisering af røde blodlegemer kan forekomme in vivo eller vitro. IgG-molekylerne, der er bundet til de røde celler, er ikke i stand til at bygge bro over kløften mellem sensibiliserede røde celler, der er adskilt fra hinanden ved den negative ladning på deres overflade, og som et resultat af hvilke de sensibiliserede røde celler ikke agglutinerer.

tilsætning af Coombs reagens (antiglobulinserum) fuldender imidlertid reaktionen. Når serumet tilsættes til de sensibiliserede celler, reagerer Fab-delen af det anti-humane globulinmolekyle (anti-IgG) med Fc-delene af to tilstødende IgG-molekyler bundet til røde celler, hvorved kløften mellem sensibiliserede røde celler broeres og forårsager agglutination.

hvis humant IgG-antistof allerede har bundet sig til patientens røde celler in vivo (i blodbanen), eller patientserumet indeholder ufuldstændige antistoffer, der kan binde sig til RBC ‘ er in vitro, vil tilsætningen af anti-humant IgG få cellerne til at agglutinere. Dette er en positiv Coombs test.

typer af Coombs Test

der er to typer Coombs-test: den direkte Coombs test og den indirekte Coombs test.

direkte Coombs Test (direkte antiglobulintest)

  • den direkte test er mere almindelig og kontrollerer for antistoffer, der er fastgjort til overfladen af røde blodlegemer.
  • i denne test finder sensibilisering af røde blodlegemer (RBC ‘ er) med ufuldstændige antistoffer sted in vivo.
  • de cellebundne antistoffer kan påvises ved denne test, hvor antiserum mod humant immunglobulin bruges til at agglutinere patientens røde blodlegemer.

indirekte Coombs Test (indirekte antiglobulintest)

  • den indirekte test kontrollerer for uafhængige antistoffer, der flyder i blodbanen.
  • i denne test finder sensibiliseringen af RBC ‘ er med ufuldstændige antistoffer sted in vitro.
  • patientens serum blandes med normale røde blodlegemer, og der tilsættes antiserum til humant immunglobulin. Agglutination opstår, hvis antistoffer er til stede i patientens serum.

krav til Coombs Test

reagensglas, centrifuge, anti-human globulin (AHG) reagens, præsensibiliserede røde celler (Coombs’ kontrolceller), saltvand.

Procedure for Coombs Test

anvendelsen af antihuman globulinserum til påvisning af sensibilisering af røde celler in vitro er en to-trins teknik udgør indirekte antiglobulintest (iat). På den anden side detekteres sensibilisering af røde celler in vivo ved en trinsteknik – den direkte antiglobulintest (dat).

direkte Coombs Test

  1. røde celler, der mistænkes for at være sensibiliserede, vaskes 3 til 4 gange i stort volumen saltvand.
  2. to dråber anti-humant globulinserum tilsættes til de sedimenterede celler.
  3. det blandes godt og centrifugeres ved 1500 o / min i et minut.
  4. Agglutination undersøges ved at holde mod en tændt baggrund og trykke på bunden af røret.
  5. hvis agglutinationen ikke ses, efterlades røret ved stuetemperatur i 10 minutter. derefter centrifugeres og læses igen. Et svagere reagerende antistof kan vise forsinket reaktion, og dette betragtes som positivt.
  6. hvis hæmagglutination ikke ses i trin 5, tilsættes en dråbe presensibiliserede røde blodlegemer (5% suspension er saltvand). Dette skulle resultere i hæmagglutination af præsensibiliserede celler, hvilket indikerer, at det antihumane globulin (AHG) er reaktivt, og resultatet er gyldigt.

indirekte Coombs Test

  1. 4% saltvandssuspension af testcellerne fremstilles.
  2. to dråber cellesuspension sættes til et lille reagensglas.
  3. to dråber antiserum tilsættes til cellesuspensionen.
  4. det inkuberes i et vandbad ved 37 liter C i 30 minutter.
  5. røret fra vandbadet fjernes og vaskes 3 til 4 gange med stort volumen saltvand. Det dekanteres helt efter sidste vask.
  6. to dråber anti human globulin (AHG) tilsættes straks og blandes godt.
  7. det centrifugeres ved 1500 o / min i et minut og undersøges for hæmagglutination.
  8. i tilfælde af negativ hæmagglutination tilsættes præsensibiliserede reagensceller for at teste AHG ‘ s reaktivitet. Agglutination skal ses med tilsætning af Coombs’ kontrolceller.

Resultatfortolkning af Coombs Test

Resultatfortolkning af Coombs Test

Positiv: en sammenklumpning af de røde blodlegemer (agglutination) under testen.

Agglutination af blodlegemer under en direkte Coombs test antyder, at antistoffer kan være til stede på patientens røde blodlegemer, og at tilstanden af hæmolyse kan fortsætte.

Agglutination af blodlegemer under en indirekte Coombs test antyder tilstedeværelsen af antistoffer, der cirkulerer i blodbanen, der kan få immunsystemet til at reagere på eventuelle røde blodlegemer, der betragtes som fremmede for kroppen — især dem, der kan være til stede under en blodtransfusion.

negativ: ingen klumpning eller agglutination af røde blodlegemer.

anvendelser af Coombs Test

  1. Coombs test er en af de blodprøver, der anvendes til at finde ud af, hvilken slags anæmi en anæmisk patient lider af.
  2. indirekte test administreres for at bestemme, om der var en potentiel dårlig reaktion på en blodtransfusion.
  3. blodbanker bruger den indirekte Coombs-test til at bestemme, om der sandsynligvis vil være en bivirkning på blod, der skal transfunderes.
  4. Coombs’ test anvendes til påvisning af anti-Rh antistoffer.
  5. det bruges også til at detektere ufuldstændige antistoffer i brucellose og andre sygdomme.
  6. den indirekte Coombs-test anvendes til prænatal test af gravide kvinder.
  7. testen udføres på den nyfødte blodprøve, normalt i indstillingen af en nyfødt med gulsot.
  8. det hjælper med påvisning af tilstande som hæmolytisk anæmi, kronisk lymfocytisk leukæmi, erythroblastosis fetalis, infektiøs mononukleose, mycoplasmal infektion, syfilis, systemisk lupus erythematosus osv.

begrænsninger af Coombs Test

  • nogle gange, især hos ældre voksne, vil en Coombs test have et unormalt resultat, selv uden nogen anden sygdom eller risikofaktorer.
  • testen kan kun sjældent bruges til at diagnosticere en medicinsk tilstand.
  1. http://www.shareyouressays.com/knowledge/useful-notes-on-coombs-test/115418
  2. Coombs, R. R.; Mourant, A. E.; Race, R. R. (1945). “En ny test til påvisning af svage og ufuldstændige Rh-agglutininer”. Britisk tidsskrift for eksperimentel patologi. 26: 255–66.
  3. Lydyard, om eftermiddagen.Immunologi (2. udgave.).London: BIOS videnskabelige udgivere.
  4. Parija S. C. (2012). Lærebog om mikrobiologi & Immunologi.(2 udgave.). Indien: Elsevier Indien.
  5. Sastry A. S. & Bhat S. K. (2016). Essentials af medicinsk mikrobiologi. Ny Delhi: Jaypee Brothers Medicinske Udgivere.

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret.