Coomb’ s Test – Přímá a Nepřímá Coomb je Test

Biologie Vzdělávací Videa

Naposledy Aktualizován dne 4. února 2021 podle Sagar Aryal

  • Coomb test je přímý aglutinační reakce, více obyčejně známý jako antiglobulinový test.
  • to bylo objeveno Coombs, Mourant a Race v roce 1945 původně pro detekci neúplných anti-Rh protilátek.
  • v testu neúplné protilátky aglutinují erytrocyty. Neúplná protilátka antiglobulin potahuje povrch erytrocytů, ale nezpůsobuje žádnou aglutinaci.
  • pokud jsou tyto erytrocyty ošetřeny antiglobulinem nebo coombsovým sérem, pak jsou buňky aglutinovány.
  • Coombsův Séru nebo Coomb činidla je speciální sérum z králíka nebo jiné zvíře dříve imunizovány s purifikovaný lidský globulin pro přípravu protilátky proti IgG a komplementu (např. králičí antisérum proti lidskému globulinu).
  • používá se v přímých a nepřímých coombových testech a také se nazývá antihumánní globulin.

Cíle Coomb ‘ s Test

K detekci červených krvinek citlivé s IgG alloantibodies, IgG autoprotilátky nebo složky komplementu.

Princip Coomb ‘ s Test

Za určitých podmínek, doplňovat bílkoviny, nebo více obyčejně, nekompletních protilátek (IgG) připojte k červené buněčné membrány tím, Fab části imunoglobulinu. O těchto buňkách se říká, že jsou senzibilizovány. Senzibilizace červených krvinek může nastat in vivo nebo vitro. IgG molekuly připojen k červené buňky jsou schopny překlenout propast mezi citlivé červené krvinky, které jsou od sebe odděleny záporný náboj na jejich povrchu, a jako výsledek, který na citlivé červené krvinky nemají srazí.

přidání coombova činidla (antiglobulinové sérum) však dokončí reakci. Když sérum je přidán do citlivé buňky, Fab část anti-lidský globulin molekuly (anti-IgG) reaguje s Fc částí dvou sousedních IgG molekuly připevněna na červené krvinky a tím překlenout propast mezi citlivé červené krvinky a způsobit aglutinaci.

Tedy, v případě, že lidský IgG protilátek již připojené k pacientovi je červená buněk in vivo (v krvi), nebo pacient sérum obsahuje neúplné protilátky, které lze připojit do červených Krvinek in vitro, pak přidání anti-human IgG způsobí, že buňky, aby se srazí. Tohle je pozitivní coombův test.

typy Coombova testu

existují dva typy testů Coombs: přímý coombův test a nepřímý coombův test.

Přímé Coomb ‘ s Test (Přímý Antiglobulinový Test)

  • přímý test je častější a kontroly pro protilátky, které jsou připojeny k povrchu červených krvinek.
  • v tomto testu probíhá senzibilizace červených krvinek (RBC) s neúplnými protilátkami in vivo.
  • protilátky vázané na buňky mohou být detekovány tímto testem, při kterém se antisérum proti lidskému imunoglobulinu používá k aglutinaci červených krvinek pacienta.

Nepřímé Coomb ‘ s Test (Nepřímý Antiglobulinový Test)

  • nepřímý test kontroluje nepřipojené protilátky, které jsou plovoucí v krvi.
  • v tomto testu probíhá senzibilizace RBC s neúplnými protilátkami in vitro.
  • sérum pacienta se smísí s normálními červenými krvinkami a přidá se antisérum k lidskému imunoglobulinu. Aglutinace nastává, pokud jsou v séru pacienta přítomny protilátky.

Požadavky na Coomb ‘ s Test

zkumavky, odstředivka, Anti-human globulin (AHG) činidla, pre-citlivé červené krvinky (Coombsův kontrolní buňky), Fyziologický roztok.

Postup Coomb ‘ s Test

použití protihumánní globulin v séru detekovat senzibilizace červených krvinek in vitro je dva jevištní techniky představují nepřímý antiglobulinový test (IAT). Na druhé straně je senzibilizace červených krvinek in vivo detekována technikou jednoho stupně-přímým antiglobulinovým testem (DAT).

přímý Coombův Test

  1. červené krvinky podezřelé ze senzibilizace se promyjí 3 až 4krát ve velkém objemu fyziologického roztoku.
  2. do sedimentovaných buněk se přidávají dvě kapky antihumánního globulinového séra.
  3. je dobře promíchán a odstředěn při 1500 ot / min po dobu jedné minuty.
  4. aglutinace se zkoumá držením na osvětleném pozadí a poklepáním na dno zkumavky.
  5. pokud není vidět aglutinace, zkumavka se ponechá při pokojové teplotě po dobu 10 minut. poté se znovu odstředí a přečte. Slabší reagující protilátka může vykazovat opožděnou reakci, což se považuje za pozitivní.
  6. pokud není v kroku 5 pozorována hemaglutinace, přidá se jedna kapka presenzibilizovaných červených krvinek (5% suspenze je fyziologický roztok). To by mělo vést v hemaglutinace pre-citlivé buňky, což naznačuje, že protihumánní globulin (AHG) je reaktivní a výsledek je platný.

nepřímý Coombův Test

  1. 4% připraví se solná suspenze testovaných buněk.
  2. do malé zkumavky se přidají dvě kapky buněčné suspenze.
  3. do buněčné suspenze se přidávají dvě kapky antiséra.
  4. inkubuje se ve vodní lázni při 37°C po dobu 30 minut.
  5. zkumavka z vodní lázně se odstraní a promyje se 3 až 4krát velkým objemem fyziologického roztoku. Po posledním praní je zcela dekantován.
  6. okamžitě se přidají dvě kapky Anti-lidského globulinu (AHG) a dobře se promíchají.
  7. se odstředí při 1500 ot / min po dobu jedné minuty a vyšetřuje se na hemaglutinaci.
  8. v případě negativní hemaglutinace se k testování reaktivity AHG přidávají pre-senzitizované reagenční buňky. Aglutinace musí být pozorována přidáním coombsových kontrolních buněk.

Výsledek Interpretace Coomb je Test

Výsledek Interpretace Coomb je Test

Pozitivní: shlukování červených krvinek (aglutinaci) v průběhu zkoušky.

aglutinace krevních buněk během přímého coombova testu naznačuje, že na červených krvinkách pacienta mohou být přítomny protilátky a že stav hemolýzy může přetrvávat.

Aglutinace krevních buněk během nepřímé Coomb testu naznačují přítomnost protilátky cirkulující v krvi, která může způsobit, že imunitní systém reagovat na červené krevní buňky, které jsou považovány za cizí pro tělo, zejména ty, které mohou být přítomny během krevní transfuze.

negativní: žádné shlukování nebo aglutinace červených krvinek.

Aplikace Coomb je Test

  1. Coomb test je jeden z krevních testů zaměstnán, aby pomohl zjistit druh anémie, anemický pacient trpí.
  2. nepřímý test se podává k určení, zda existuje potenciální špatná reakce na krevní transfuzi.
  3. Krevní banky použít nepřímý Coombsův test k určení, zda je pravděpodobné, že být nepříznivé reakce na krevní transfuzi.
  4. Coombsovy testy se používají k detekci anti-Rh protilátek.
  5. používá se také k detekci neúplných protilátek při brucelóze a dalších onemocněních.
  6. nepřímý Coombsův test se používá při prenatálním testování těhotných žen.
  7. test se provádí na vzorku krve novorozence, obvykle v prostředí novorozence se žloutenkou.
  8. pomáhá v odhalení podmínek, jako je hemolytická anémie, chronická lymfatická leukémie, erythroblastosis fetalis, infekční mononukleóza, mykoplazmových infekcí, syfilis, systémový lupus erythematodes apod.

omezení Coombova testu

  • někdy, zejména u starších dospělých, bude mít Coombův test abnormální výsledek i bez jakéhokoli jiného onemocnění nebo rizikových faktorů.
  • test lze použít pouze zřídka k diagnostice zdravotního stavu.
  1. http://www.shareyouressays.com/knowledge/useful-notes-on-coombs-test/115418
  2. Coombs, R. R.; Mourant, A. E.; Závod, R. R. (1945). “Nový test pro detekci slabých a neúplných Rh aglutininů”. Britský žurnál experimentální patologie. 26: 255–66.
  3. Lydyard, p. m., Whelan, a.,& Fanger, m. w. (2005).Imunologie (2 ed.).Londýn: BIOS Scientific Publishers.
  4. Parija S.C. (2012). Učebnice mikrobiologie & imunologie.(2 ed.). Indie: Elsevier Indie.
  5. Sastry A. S. & Bhat S. K. (2016). Základy lékařské mikrobiologie. Nové Dillí: Jaypee Brothers Medical Publishers.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.