Prueba de Coomb: Prueba Directa e Indirecta de Coomb

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Última actualización el 4 de febrero de 2021 por Sagar Aryal

  • La prueba de Coomb es una reacción de aglutinación directa, más comúnmente conocida como prueba de antiglobulina.
  • Fue descubierto por Coombs, Mourant y Race en 1945, originalmente para la detección de anticuerpos anti-Rh incompletos.
  • En la prueba, los anticuerpos incompletos no aglutinan los eritrocitos. La antiglobulina de anticuerpo incompleta recubre la superficie de los eritrocitos, pero no causa aglutinación.
  • Cuando estos eritrocitos se tratan con antiglobulina o suero de Coombs, las células se aglutinan.
  • El suero de Coombs o reactivo de Coomb es un suero especial de un conejo u otro animal previamente inmunizado con globulina humana purificada para preparar anticuerpos dirigidos contra IgG y complemento (por ejemplo. antisuero de conejo contra globulina humana).
  • Se utiliza en las pruebas directas e indirectas de Coomb y también se llama globulina antihumana.

Objetivos de la prueba de Coomb

Para detectar glóbulos rojos sensibilizados con aloanticuerpos IgG, autoanticuerpos IgG o componentes del complemento.

Principio de la prueba de Coomb

Bajo ciertas condiciones, las proteínas del complemento o, más comúnmente, los anticuerpos incompletos (IgG) se adhieren a la membrana de los glóbulos rojos mediante la porción Fab de la inmunoglobulina. Se dice que estas células están sensibilizadas. La sensibilización de los glóbulos rojos puede producirse in vivo o vitro. Las moléculas de IgG unidas a los glóbulos rojos son incapaces de salvar la brecha entre los glóbulos rojos sensibilizados que están separados entre sí por la carga negativa en su superficie y, como resultado, los glóbulos rojos sensibilizados no se aglutinan.

Sin embargo, la adición del reactivo de Coomb (suero antiglobulina) completa la reacción. Cuando el suero se agrega a las células sensibilizadas, la porción Fab de la molécula de globulina antihumana (anti-IgG) reacciona con las porciones Fc de dos moléculas IgG adyacentes unidas a los glóbulos rojos, cerrando así la brecha entre los glóbulos rojos sensibilizados y causando aglutinación.

Por lo tanto, si el anticuerpo IgG humano ya se ha unido a los glóbulos rojos del paciente in vivo (en el torrente sanguíneo), o el suero del paciente contiene anticuerpos incompletos que pueden unirse a los glóbulos rojos in vitro, la adición de IgG antihumana hará que las células se aglutinen. Esta es una prueba positiva de Coomb.

Tipos de prueba de Coomb

Hay dos tipos de pruebas de Coombs: la prueba directa de Coomb y la prueba indirecta de Coomb.

Prueba Directa de Coomb (Prueba Directa de Antiglobulina)

  • La prueba directa es más común y busca anticuerpos adheridos a la superficie de los glóbulos rojos.
  • En esta prueba, la sensibilización de los glóbulos rojos (glóbulos rojos) con anticuerpos incompletos se realiza in vivo.
  • Los anticuerpos unidos a las células se pueden detectar mediante esta prueba en la que se utiliza un antisuero contra la inmunoglobulina humana para aglutinar los glóbulos rojos del paciente.

Prueba Indirecta de Coomb (Prueba Indirecta de Antiglobulina)

  • La prueba indirecta comprueba si hay anticuerpos sueltos que flotan en el torrente sanguíneo.
  • En esta prueba, la sensibilización de los glóbulos rojos con anticuerpos incompletos se realiza in vitro.
  • El suero del paciente se mezcla con glóbulos rojos normales y se agrega antisuero a la inmunoglobulina humana. La aglutinación se produce si hay anticuerpos presentes en el suero del paciente.

Requisitos para la prueba de Coomb

Tubos de ensayo, centrifugadora, reactivo antiglobulina humana (AHG), eritrocitos sensibilizados previamente (células de control de Coombs), solución salina.

Procedimiento de la prueba de Coomb

El uso de suero de globulina antihumana para detectar la sensibilización de glóbulos rojos in vitro es una técnica de dos etapas que constituye la prueba de antiglobulina indirecta (TAI). Por otro lado, la sensibilización de los glóbulos rojos in vivo se detecta mediante una técnica de una etapa: la prueba de antiglobulina directa (DAT).

Prueba directa de Coomb

  1. Los glóbulos rojos sospechosos de estar sensibilizados se lavan de 3 a 4 veces en un gran volumen de solución salina.
  2. Se añaden dos gotas de suero de globulina antihumana a las células sedimentadas.
  3. Se mezcla bien y se centrifuga a 1500 rpm durante un minuto.
  4. La aglutinación se examina sujetándola contra un fondo iluminado y golpeando la parte inferior del tubo.
  5. Si no se observa la aglutinación, el tubo se deja a temperatura ambiente durante 10 min. luego, vuelva a centrifugar y lea. Un anticuerpo de reacción más débil puede mostrar una reacción retardada y esto se considera positivo.
  6. Si no se observa hemaglutinación en el paso 5, se añade una gota de glóbulos rojos presensibilizados (la suspensión al 5% es salina). Esto debe dar lugar a la hemaglutinación de células sensibilizadas previamente, lo que indica que la globulina antihumana (AHG) es reactiva y el resultado es válido.

Prueba indirecta de Coomb

  1. 4% se prepara la suspensión salina de las células de prueba.
  2. Se añaden dos gotas de suspensión celular a un pequeño tubo de ensayo.
  3. Se añaden dos gotas de antisuero a la suspensión celular.
  4. Se incuba en un baño de agua a 37°C durante 30 min.
  5. El tubo del baño de agua se retira y se lava de 3 a 4 veces con un gran volumen de solución salina. Se decanta completamente después del último lavado.
  6. Se añaden inmediatamente y se mezclan bien dos gotas de antiglobulina humana (AHG).
  7. Se centrifuga a 1500 rpm durante un minuto y se examina para hemaglutinación.
  8. En caso de hemaglutinación negativa, se añaden células reactivas sensibilizadas para comprobar la reactividad de la AHG. La aglutinación debe verse con la adición de células de control de Coombs.

Interpretación de resultados de la Prueba de Coomb

Interpretación de resultados de la Prueba de Coomb

Positivo: Un agrupamiento de los glóbulos rojos (aglutinación) durante la prueba.

La aglutinación de células sanguíneas durante una prueba directa de Coomb sugiere que los anticuerpos pueden estar presentes en los glóbulos rojos del paciente y que la condición de hemólisis puede persistir.

La aglutinación de células sanguíneas durante una prueba indirecta de Coomb sugiere la presencia de anticuerpos que circulan en el torrente sanguíneo que podrían hacer que el sistema inmunitario reaccione a cualquier glóbulos rojos que se consideren extraños al cuerpo, en particular los que pueden estar presentes durante una transfusión de sangre.

Negativo: No hay aglutinación o aglutinación de glóbulos rojos.

Aplicaciones de la prueba de Coomb

  1. La prueba de Coomb es uno de los análisis de sangre empleados para ayudar a averiguar el tipo de anemia que sufre un paciente anémico.
  2. Se administra una prueba indirecta para determinar si hubo una reacción adversa potencial a una transfusión de sangre.
  3. Los bancos de sangre utilizan la prueba de Coombs indirecto para determinar si es probable que se produzca una reacción adversa a la sangre que se va a transfundir.
  4. Las pruebas de Coombs se utilizan para la detección de anticuerpos anti-Rh.
  5. También se utiliza para detectar anticuerpos incompletos en la brucelosis y otras enfermedades.
  6. La prueba indirecta de Coombs se utiliza en las pruebas prenatales de mujeres embarazadas.
  7. El examen se realiza en la muestra de sangre del recién nacido, por lo general en el entorno de un recién nacido con ictericia.
  8. Ayuda en la detección de afecciones como anemia hemolítica, leucemia linfocítica crónica, eritroblastosis fetal, mononucleosis infecciosa, infección micoplasmática, sífilis, lupus eritematoso sistémico, etc.

Limitaciones de la prueba de Coomb

  • A veces, especialmente en adultos mayores, una prueba de Coomb tendrá un resultado anormal incluso sin ninguna otra enfermedad o factor de riesgo.
  • El examen solo se puede usar en raras ocasiones para diagnosticar una afección médica.
  1. http://www.shareyouressays.com/knowledge/useful-notes-on-coombs-test/115418
  2. Coombs, R. R.; Mourant, A. E.; Race, R. R. (1945). “Una nueva prueba para la detección de débil e incompleta Rh aglutininas”. British journal of experimental pathology. 26: 255–66.
  3. Lydyard, P. M., Whelan, A.,& Fanger, M. W. (2005).Immunology (2 ed.).Londres: BIOS Scientific Publishers.
  4. Parija S. C. (2012). Libro de Microbiología & Inmunología.(2 ed.). India: Elsevier India.
  5. Sastry A. S. & Bhat S. K. (2016). Fundamentos de Microbiología Médica. Nueva Delhi: Jaypee Brothers Medical Publishers.

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