Coomb ‘s Test – Direct and Indirect Coomb’ s Test

Biology Educational Videos

laatst bijgewerkt op 4 februari 2021 door Sagar Aryal

  • Coomb ‘ s test is een directe agglutinatiereactie, beter bekend als antiglobulinetest.Het werd ontdekt door Coombs, Mourant en Race in 1945 voor de detectie van onvolledige anti-Rh antilichamen.
  • in de test agglutineren onvolledige antilichamen geen erytrocyten. Onvolledig antilichaam antiglobuline bedekt het oppervlak van erytrocyten, maar veroorzaakt geen agglutinatie.
  • wanneer dergelijke erytrocyten worden behandeld met antiglobuline of Coombs-serum, worden de cellen agglutineerd.
  • Coombs-Serum of Coomb-reagens is een speciaal serum van een konijn of ander dier dat eerder is geïmmuniseerd met gezuiverd humaan globuline om antilichamen tegen IgG en complement (bijv. konijn antiserum tegen menselijke globuline).
  • het wordt gebruikt in de directe en indirecte Coomb-tests en wordt ook wel antihumane globuline genoemd.

doelstellingen van de test van Coomb

om rode bloedcellen te detecteren gesensibiliseerd met IgG alloantibodies, IgG autoantibodies of complementcomponenten.

beginsel van de Coomb-Test

onder bepaalde voorwaarden, complement eiwitten of meer in het algemeen, onvolledige antilichamen (IgG) hechten aan rode celmembraan door het Fab-gedeelte van de immunoglobuline. Van deze cellen wordt gezegd dat ze gevoelig zijn. Sensibilisatie van rode cellen kan optreden in vivo of vitro. De moleculen IgG in bijlage aan de rode cellen zijn niet in staat om de kloof tussen sensibiliseerde rode cellen te overbruggen die van elkaar door de negatieve lading op hun oppervlakte worden gescheiden en waardoor de sensibiliseerde rode cellen niet agglutineren.

toevoeging van het Coomb-reagens (antiglobulineserum) maakt de reactie echter compleet. Wanneer het serum aan de gesensibiliseerde cellen wordt toegevoegd, reageert het Fab-gedeelte van het anti-humane globulinemolecuul (anti-IgG) met de Fc-gedeelten van twee aangrenzende IgG-molecules in bijlage aan rode cellen waardoor de kloof tussen de gesensibiliseerde rode cellen wordt overbrugd en agglutinatie wordt veroorzaakt.

als humaan IgG-antilichaam zich in vivo (in de bloedbaan) al aan de rode cellen van de patiënt heeft gehecht, of als het serum van de patiënt onvolledige antilichamen bevat die zich in vitro aan RBC ‘ s kunnen hechten, zal de toevoeging van anti-humaan IgG de cellen doen agglutineren. Dit is een positieve Coomb ‘ s test.

soorten Coomb-Test

er zijn twee soorten Coombs-tests: de directe Coomb-test en de indirecte Coomb-test.

directe Coomb-Test (directe Antiglobulinetest)

  • de directe test komt vaker voor en controleert op antilichamen die aan het oppervlak van rode bloedcellen zijn bevestigd.
  • in deze test vindt de sensibilisatie van rode bloedcellen (RBC ‘ s) met onvolledige antilichamen in vivo plaats.
  • de celgebonden antilichamen kunnen worden gedetecteerd met deze test waarbij antiserum tegen humane immunoglobuline wordt gebruikt om de rode bloedcellen van de patiënt te agglutineren.

indirecte Coomb-Test (indirecte Antiglobulinetest)

  • de indirecte test controleert op losse antilichamen die in de bloedbaan zweven.
  • in deze test vindt de sensibilisatie van RBC ‘ s met onvolledige antilichamen in vitro plaats.
  • het serum van de patiënt wordt gemengd met normale rode bloedcellen en antiserum aan humaan immunoglobuline wordt toegevoegd. Agglutinatie treedt op als antilichamen aanwezig zijn in het serum van de patiënt.

vereisten voor de Coomb-Test

reageerbuisjes, centrifuge, Anti-human globuline (AHG) reagens, voorgesensibiliseerde rode cellen (Coombs ‘ controlecellen), zoutoplossing.

Procedure van de Coomb-Test

het gebruik van antihuman globuline serum om Sensibilisatie van rode cellen in vitro te detecteren is een techniek in twee fasen vormen indirecte antiglobulinetest (IAT). Anderzijds, Sensibilisatie van rode cellen in vivo wordt gedetecteerd door één stadium techniek-de directe antiglobulinetest (DAT).

directe Coomb-Test

  1. rode cellen waarvan wordt vermoed dat ze gevoelig zijn, worden 3 tot 4 keer gewassen in een grote hoeveelheid zoutoplossing.
  2. aan de gesedimenteerde cellen worden twee druppels anti-humaan globulineserum toegevoegd.
  3. het wordt goed gemengd en gecentrifugeerd bij 1500 tpm gedurende één minuut.
  4. agglutinatie wordt onderzocht door tegen een verlichte achtergrond te houden en op de bodem van de buis te tikken.
  5. indien de agglutinatie niet wordt waargenomen, wordt de buis gedurende 10 minuten op kamertemperatuur gelaten. dan opnieuw gecentrifugeerd en gelezen. Een zwakker reagerende antilichaam kan vertraagde reactie vertonen en dit wordt als positief beschouwd.
  6. als hemagglutinatie niet wordt waargenomen in Stap 5, wordt één druppel presensibiliseerde rode bloedcellen (5% suspensie is een zoutoplossing) toegevoegd. Dit moet resulteren in hemagglutinatie van vooraf gesensibiliseerde cellen, wat aangeeft dat het antihumane globuline (AHG) reactief is en het resultaat geldig is.

indirecte Coomb-Test

  1. 4% Er wordt een zoutoplossing van de testcellen bereid.
  2. twee druppels celsuspensie worden toegevoegd aan een kleine reageerbuis.
  3. aan de celsuspensie worden twee druppels antiserum toegevoegd.
  4. het wordt gedurende 30 minuten in een waterbad bij 37°C geïncubeerd.
  5. de buis uit het waterbad wordt verwijderd en 3 tot 4 maal gewassen met een grote hoeveelheid zoutoplossing. Het is volledig gedecanteerd na het laatste wassen.
  6. twee druppels anti-humaan globuline (AHG) worden onmiddellijk toegevoegd en goed gemengd.
  7. het wordt gedurende 1 minuut gecentrifugeerd bij 1500 toeren per minuut en onderzocht op hemagglutinatie.
  8. in geval van negatieve hemagglutinatie worden vooraf gesensibiliseerde reagenscellen toegevoegd om de reactiviteit van AHG te testen. Agglutinatie moet worden waargenomen met de toevoeging van controlecellen van Coombs.

resultaat interpretatie van de Coomb-Test

 resultaat interpretatie van de Coomb-Test

positief: samenklontering van de rode bloedcellen (agglutinatie) tijdens de test.Agglutinatie van bloedcellen tijdens een directe Coomb-test suggereert dat er antilichamen aanwezig kunnen zijn op rode bloedcellen van de patiënt en dat de toestand van hemolyse kan aanhouden.Agglutinatie van bloedcellen tijdens een indirecte Coomb — test wijst op de aanwezigheid van in de bloedbaan circulerende antilichamen die het immuunsysteem kunnen doen reageren op rode bloedcellen die als lichaamsvreemd worden beschouwd, met name die welke tijdens een bloedtransfusie aanwezig kunnen zijn.

negatief: geen klontering of agglutinatie van rode bloedcellen.

toepassingen van Coomb ‘s Test

  1. Coomb’ s test is een van de bloedtesten die worden gebruikt om te helpen bij het achterhalen van het soort bloedarmoede waaraan een bloedarmoedepatiënt lijdt.
  2. indirecte test wordt uitgevoerd om te bepalen of er een mogelijk slechte reactie op een bloedtransfusie was.
  3. bloedbanken gebruiken de indirecte Coombs-test om te bepalen of er waarschijnlijk een bijwerking optreedt bij bloedtransfusie.
  4. de Coombs-tests worden gebruikt voor de detectie van anti-Rh-antilichamen.
  5. het wordt ook gebruikt om onvolledige antilichamen bij brucellose en andere ziekten op te sporen.
  6. de indirecte Coombs-test wordt gebruikt bij prenatale tests bij zwangere vrouwen.
  7. de test wordt uitgevoerd op het bloedmonster van de pasgeborene, meestal bij een pasgeborene met geelzucht.
  8. het helpt bij de detectie van aandoeningen zoals hemolytische anemie, chronische lymfatische leukemie, erytroblastosis fetalis, infectieuze mononucleosis, mycoplasmale infectie, syfilis, systemische lupus erythematosus enz.

beperkingen van de Coomb-Test

  • soms, vooral bij oudere volwassenen, zal een Coomb-test een abnormaal resultaat hebben, zelfs zonder enige andere ziekte of risicofactoren.
  • de test kan slechts zelden worden gebruikt om een medische aandoening te diagnosticeren.
  1. http://www.shareyouressays.com/knowledge/useful-notes-on-coombs-test/115418
  2. Coombs, R. R.; Mourant, A. E.; Race, R. R. (1945). “Een nieuwe test voor de detectie van zwakke en onvolledige RH-agglutininen”. British journal of experimental pathology. 26: 255–66.
  3. Lydyard, p. m., Whelan, A.,& Fanger, M. W. (2005).Immunologie (2 ed.).London: BIOS Scientific Publishers.
  4. Parija S. C. (2012). Studieboek Microbiologie & Immunologie.(2 ed.). India: Elsevier India.
  5. Sastry A. S. & Bhat S. K. (2016). Essentials van Medische Microbiologie. New Delhi: Jaypee Brothers Medical Publishers.

Geef een antwoord

Het e-mailadres wordt niet gepubliceerd.