Coomb do Teste, Directo e Indirecto, Coomb de Teste

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Atualizada por Último sobre 4 de fevereiro de 2021, por Sagar Aryal

  • Coomb de teste é um direto de aglutinação de reação, mais comumente conhecido como antiglobulin teste.Foi descoberto por Coombs, Mourant e Race em 1945 originalmente para a detecção de anticorpos anti-Rh incompletos.
  • no teste, os anticorpos incompletos não aglutinam os eritrócitos. A Antiglobulina de anticorpos incompletos cobre a superfície dos eritrócitos, mas não provoca qualquer aglutinação. Quando estes eritrócitos são tratados com Antiglobulina ou soro de Coombs, as células são aglutinadas.O soro de Coombs ou reagente de Coomb é um soro especial de um coelho ou outro animal previamente imunizado com globulina humana purificada para preparar anticorpos dirigidos contra IgG e complemento (por exemplo. antissoro de coelho contra a globulina humana).
  • é usado nos testes diretos e indiretos do Coomb e também chamado de globulina anti-humana.

objectivos do ensaio de Coomb

para detectar glóbulos vermelhos sensibilizados com liga IgG, auto-anticorpos IgG ou componentes do complemento.

princípio do ensaio de Coomb

sob certas condições, as proteínas do complemento ou, mais frequentemente, os anticorpos incompletos (IgG) ligam-se à membrana dos glóbulos vermelhos pela porção Fab da imunoglobulina. Diz-se que estas células são sensibilizadas. Pode ocorrer sensibilização dos glóbulos vermelhos in vivo ou in vitro. As moléculas de IgG ligadas aos glóbulos vermelhos são incapazes de preencher a lacuna entre as células vermelhas sensibilizadas que são separadas umas das outras pela carga negativa na sua superfície e como resultado da qual as células vermelhas sensibilizadas não aglutinam.

a adição do reagente do Coomb (soro de Antiglobulina), no entanto, completa a reacção. Quando o soro é adicionado às células sensibilizadas, a porção Fab da molécula de globulina anti-humana (anti-IgG) reage com as porções Fc de duas moléculas de IgG adjacentes ligadas aos glóbulos vermelhos, ligando assim o intervalo entre os glóbulos vermelhos sensibilizados e causando aglutinação.

assim, se o anticorpo IgG humano já estiver ligado aos glóbulos vermelhos do doente in vivo (na corrente sanguínea), ou se o soro do doente contiver anticorpos incompletos que possam ligar-se a hemácias in vitro, a adição de IgG anti-humana provocará a aglutinação das células. Este é um teste positivo do Coomb.

tipos de ensaio do Coomb

existem dois tipos de testes de Coombs: o teste do Coombs direto e o teste do Coombs indireto.

Teste do Coombs directo (teste da Antiglobulina directa ))

  • o teste direto é mais comum e verifica se há anticorpos que estão ligados à superfície dos glóbulos vermelhos.
  • neste teste, a sensibilização de glóbulos vermelhos (RBC) com anticorpos incompletos ocorre in vivo.
  • os anticorpos com ligação celular podem ser detectados através deste teste no qual o anti-soro contra a imunoglobulina humana é utilizado para aglutinar os glóbulos vermelhos do doente.

ensaio indirecto do Coombs (ensaio indirecto da Antiglobulina))

  • o teste indirecto verifica se há anticorpos não ligados que flutuam na corrente sanguínea.
  • neste teste, a sensibilização de RBC com anticorpos incompletos ocorre in vitro.
  • o soro do doente é misturado com glóbulos vermelhos normais e é adicionado anti-soro à imunoglobulina humana. A aglutinação ocorre se estiverem presentes anticorpos no soro do doente.

requisitos para o ensaio de Coomb

tubos de ensaio, centrifugadora, reagente de globulina Anti-humana (AHG), glóbulos vermelhos pré-sensibilizados (células de controlo de Coombs), solução salina.

procedimento de ensaio do Coomb

a utilização in vitro de soro de globulina anti-humana para detectar a sensibilização de glóbulos vermelhos é uma técnica em duas fases que constitui o teste indirecto de Antiglobulina (IAT). Por outro lado, a sensibilização de glóbulos vermelhos in vivo é detectada por uma técnica de fase – o ensaio directo de Antiglobulina (DAT).

ensaio de Coombs directos

  1. os glóbulos vermelhos suspeitos de serem sensibilizados são lavados 3 a 4 vezes em grande volume de solução salina.
  2. duas gotas de soro anti-globulina humana são adicionadas às células sedimentadas.
  3. é misturado bem e centrifugado a 1500 rpm por um minuto.
  4. A aglutinação é examinada segurando-se contra um fundo iluminado e batendo no fundo do tubo.Se a aglutinação não for vista, o tubo é deixado à temperatura ambiente durante 10 minutos. depois, centrifugou-se e leu. Um anticorpo de reacção mais fraca pode apresentar reacção retardada, o que é considerado positivo.Se a hemaglutinação não for observada no Passo 5, adiciona-se uma gota de glóbulos vermelhos pré-sensibilizados (suspensão salina a 5%). Tal deve resultar na hemaglutinação de células pré-sensibilizadas, indicando que a globulina anti-humana (AHG) é reactiva e que o resultado é válido.

ensaio indirecto do Coomb

  1. 4% prepara-se uma suspensão salina das células de ensaio.
  2. duas gotas de suspensão celular são adicionadas a um pequeno tubo de ensaio.
  3. duas gotas de anti-soro são adicionadas à suspensão celular.
  4. incuba-se em banho-maria a 37°C durante 30 minutos.O tubo do banho-maria é removido e lavado 3 a 4 vezes com um grande volume de solução salina. É completamente decantado após a última lavagem.
  5. duas gotas de globulina anti-humana (AHG) são imediatamente adicionadas e bem misturadas.É centrifugado a 1500 rpm durante um minuto e examinado para hemaglutinação.
  6. em caso de hemaglutinação negativa, adicionam-se células de reagente pré-sensibilizadas para testar a reactividade da AHG. A aglutinação deve ser vista com a adição de células de controlo de Coombs.

Result Interpretation of Coomb’s Test

Result Interpretation of Coomb's Test

Positive: A clumping of the red blood cells (aglutination) during the test.

aglutinação de células sanguíneas durante um teste de Coombs direto sugere que os anticorpos podem estar presentes nos glóbulos vermelhos do paciente e que a condição de hemólise pode persistir.

aglutinação de células sanguíneas durante o teste de um Coombs indireto sugere a presença de anticorpos circulando na corrente sanguínea que podem fazer com que o sistema imunitário reaja a quaisquer glóbulos vermelhos que sejam considerados estranhos ao organismo — particularmente aqueles que podem estar presentes durante uma transfusão sanguínea.

Negativo: sem aglomeração ou aglutinação de glóbulos vermelhos.

Applications of Coomb’s Test

  1. Coomb’s test is one of the blood tests employed to help find out the kind of anemia anemic patient is suffering from.
  2. é administrado um teste indirecto para determinar se houve uma potencial má reacção a uma transfusão sanguínea.
  3. os bancos de sangue utilizam o teste indirecto de Coombs para determinar se é provável que haja uma reacção adversa ao sangue a transfusão. Os testes de Coombs são utilizados para detecção de anticorpos anti-Rh.
  4. também é usado para detectar anticorpos incompletos na brucelose e outras doenças.
  5. o teste indirecto de Coombs é utilizado nos testes pré-natais de mulheres grávidas.
  6. o teste é feito na amostra de sangue do recém-nascido, geralmente no cenário de um recém-nascido com icterícia.
  7. ajuda na detecção de doenças como anemia hemolítica, leucemia linfocítica crónica, eritroblastose fetalis, mononucleose infecciosa, infecção micoplasmática, sífilis, lúpus eritematoso sistémico, etc.

limitações do teste de Coomb

  • por vezes, especialmente em adultos mais velhos, o teste de Coomb terá um resultado anormal, mesmo sem qualquer outra doença ou fatores de risco.
  • o teste só pode ser raramente usado para diagnosticar uma condição médica.
  1. http://www.shareyouressays.com/knowledge/useful-notes-on-coombs-test/115418
  2. Coombs, R. R.; Mourant, A. E.; Raça, R. R. (1945). “A new test for the detection of weak and incomplete Rh aglutinins”. British journal of experimental pathology. 26: 255–66.
  3. Lydyard, P. M., Whelan,A.,& Fanger,M. W. (2005).Imunologia (2 ed.).Londres: BIOS Scientific Publishers.
  4. Parija S. C. (2012). Textbook of Microbiology & Immunology.(2 ed.). India: Elsevier India.
  5. Sastry A. S. & Bhat S. K. (2016). Essentials of Medical Microbiology. New Delhi: Jaypee Brothers Medical Publishers.

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