Coomb ‘s Test – Direct and Indirect Coomb’ s Test

Biology Educational Videos

actualizat ultima dată pe 4 februarie 2021 de Sagar Aryal

  • testul Coomb este o reacție de aglutinare directă, mai cunoscută sub numele de test antiglobulin.
  • a fost descoperit de Coombs, Mourant și Race în 1945 inițial pentru detectarea anticorpilor anti-Rh incompleți.
  • în test, anticorpii incompleți nu aglutinează eritrocitele. Anticorpul incomplet antiglobulina acoperă suprafața eritrocitelor, dar nu provoacă nici o aglutinare.
  • când aceste eritrocite sunt tratate cu antiglobulină sau ser Coombs, celulele sunt aglutinate.
  • serul Coombs sau reactivul Coomb este un ser special de la un iepure sau alt animal imunizat anterior cu globulină umană purificată pentru a prepara anticorpi direcționați împotriva IgG și complementului (de ex. antiser de iepure împotriva globulinei umane).
  • este utilizat în testele Coomb directe și indirecte și, de asemenea, numit globulină antiumană.

obiectivele testului Coomb

pentru a detecta celulele roșii din sânge sensibilizate cu aloanticorpi IgG, autoanticorpi IgG sau componente ale complementului.

principiul testului lui Coomb

în anumite condiții, proteinele complementare sau, mai frecvent, anticorpii incompleți (IgG) se atașează de membrana celulelor roșii prin porțiunea Fab a imunoglobulinei. Se spune că aceste celule sunt sensibilizate. Sensibilizarea celulelor roșii poate apărea in vivo sau vitro. Moleculele IgG atașate la celulele roșii nu sunt capabile să reducă decalajul dintre celulele roșii sensibilizate care sunt separate una de cealaltă de sarcina negativă de pe suprafața lor și ca urmare a faptului că celulele roșii sensibilizate nu se aglutinează.

adăugarea reactivului Coomb (ser antiglobulină) completează totuși reacția. Când serul este adăugat la celulele sensibilizate, porțiunea Fab a moleculei de globulină anti-umană (anti-IgG) reacționează cu porțiunile Fc ale două molecule IgG adiacente atașate la celulele roșii, reducând astfel decalajul dintre celulele roșii sensibilizate și provocând aglutinarea.

astfel, dacă anticorpul IgG uman s-a atașat deja la celulele roșii ale pacientului in vivo (în fluxul sanguin) sau serul pacientului conține anticorpi incompleți care se pot atașa la RBC in vitro, atunci adăugarea de IgG anti-uman va determina aglutinarea celulelor. Acesta este un test Coomb pozitiv.

tipuri de test Coomb

există două tipuri de teste Coombs: testul Coomb direct și testul Coomb Indirect.

testul Coomb Direct (testul Antiglobulin Direct)

  • testul direct este mai frecvent și verifică anticorpii care sunt atașați la suprafața globulelor roșii.
  • în acest test, sensibilizarea globulelor roșii (RBC) cu anticorpi incompleți are loc in vivo.
  • anticorpii legați celular pot fi detectați prin acest test în care antiserul împotriva imunoglobulinei umane este utilizat pentru aglutinarea celulelor roșii ale pacientului.

testul Coomb Indirect (testul Antiglobulin Indirect)

  • testul indirect verifică anticorpii neatașați care plutesc în sânge.
  • în acest test, sensibilizarea RBC-urilor cu anticorpi incompleți are loc in vitro.
  • serul pacientului este amestecat cu celule roșii normale și se adaugă antiser la imunoglobulina umană. Aglutinarea apare dacă anticorpii sunt prezenți în serul pacientului.

cerințe pentru testul Coomb

eprubete, centrifugă, reactiv anti-globulină umană (AHG), celule roșii pre-sensibilizate (celule de control Coombs), soluție salină.

procedura testului Coomb

utilizarea serului de globulină antiumană pentru detectarea sensibilizării celulelor roșii in vitro este o tehnică în două etape care constituie testul antiglobulin indirect (IAT). Pe de altă parte, sensibilizarea celulelor roșii in vivo este detectată printr – o tehnică de etapă-testul antiglobulin direct (DAT).

testul lui Coomb Direct

  1. celulele roșii suspectate de sensibilizare sunt spălate de 3 până la 4 ori în volum mare de soluție salină.
  2. două picături de ser de globulină anti-umană se adaugă la celulele sedimentate.
  3. se amestecă bine și se centrifughează la 1500 rpm Timp de un minut.
  4. aglutinarea este examinată ținându-se pe un fundal luminat și atingând fundul tubului.
  5. dacă nu se observă aglutinarea, tubul este lăsat la temperatura camerei timp de 10 minute. apoi re-centrifugat și citit. Un anticorp cu reacție mai slabă poate prezenta o reacție întârziată și acest lucru este considerat pozitiv.
  6. dacă hemaglutinarea nu este observată la etapa 5, se adaugă o picătură de globule roșii presensibilizate (suspensie de 5% este soluție salină). Acest lucru ar trebui să conducă la hemaglutinarea celulelor pre-sensibilizate, indicând faptul că globulina antiumană (AHG) este reactivă și rezultatul este valabil.

testul Coomb Indirect

  1. 4% Se prepară suspensia salină a celulelor testate.
  2. se adaugă două picături de suspensie celulară într-o eprubetă mică.
  3. două picături de antiser se adaugă la suspensia celulară.
  4. se incubează într-o baie de apă la 37 CTC timp de 30 min.
  5. tubul din Baia de apă este îndepărtat și spălat de 3 până la 4 ori cu un volum mare de soluție salină. Se decantează complet după ultima spălare.
  6. două picături de globulină anti-umană (AHG) se adaugă imediat și se amestecă bine.
  7. se centrifughează la 1500 rpm Timp de un minut și se examinează pentru hemaglutinare.
  8. în cazul hemaglutinării negative, se adaugă celule reactive pre-sensibilizate pentru a testa reactivitatea AHG. Aglutinarea trebuie observată cu adăugarea celulelor de control ale lui Coombs.

interpretarea rezultatului testului Coomb

interpretarea rezultatului testului Coomb

pozitiv: o aglomerare a celulelor roșii din sânge (aglutinare) în timpul testului.

aglutinarea celulelor sanguine în timpul unui test Coomb direct sugerează că anticorpii pot fi prezenți pe globulele roșii ale pacientului și că starea hemolizei poate persista.

aglutinarea celulelor sanguine în timpul unui test coomb indirect sugerează prezența anticorpilor care circulă în sânge care ar putea determina sistemul imunitar să reacționeze la orice globule roșii care sunt considerate străine organismului — în special cele care pot fi prezente în timpul unei transfuzii de sânge.

negativ: fără aglomerare sau aglutinare a globulelor roșii.

aplicații ale testului Coomb

  1. testul Coomb este unul dintre testele de sânge folosite pentru a ajuta la aflarea tipului de anemie de care suferă un pacient anemic.
  2. testul Indirect este administrat pentru a determina dacă a existat o potențială reacție proastă la o transfuzie de sânge.
  3. băncile de sânge utilizează testul indirect Coombs pentru a determina dacă este probabil să existe o reacție adversă la sângele care urmează să fie transfuzat.
  4. testele Coombs sunt utilizate pentru detectarea anticorpilor anti-Rh.
  5. este, de asemenea, utilizat pentru a detecta anticorpi incompleți în bruceloză și alte boli.
  6. testul Coombs indirect este utilizat în testarea prenatală a femeilor însărcinate.
  7. testul se face pe proba de sânge a nou-născutului, de obicei în cadrul unui nou-născut cu icter.
  8. ajută la detectarea unor afecțiuni precum anemia hemolitică, leucemia limfocitară cronică, erythroblastosis fetalis, mononucleoza infecțioasă, infecția cu micoplasmă, sifilisul, lupusul eritematos sistemic etc.

limitări ale testului Coomb

  • uneori, în special la adulții mai în vârstă, testul Coomb va avea un rezultat anormal chiar și fără alte boli sau factori de risc.
  • testul poate fi folosit rar pentru a diagnostica o afecțiune medicală.
  1. http://www.shareyouressays.com/knowledge/useful-notes-on-coombs-test/115418
  2. Coombs, R. R.; Mourant, A. E.; Rasă, R. R. (1945). “Un nou test pentru detectarea aglutininelor Rh slabe și incomplete”. Jurnalul britanic de patologie experimentală. 26: 255–66.
  3. Lydyard, p.m., Whelan,A., & Fanger,M. W. (2005).Imunologie (2 ed.).Londra: Editori științifice BIOS.
  4. Parija S. C. (2012). Manual de Microbiologie & Imunologie.(2 ed.). India: Elsevier India.
  5. Sastry A. S. & Bhat S. K. (2016). Esențiale ale microbiologiei medicale. New Delhi: Jaypee Brothers Editori Medicali.

Lasă un răspuns

Adresa ta de email nu va fi publicată.