Coombs Test – direkt och indirekt Coombs Test

biologiska pedagogiska videor

Senast uppdaterad den 4 februari 2021 av Sagar Aryal

  • Coombs test är en direkt agglutinationsreaktion, mer känd som antiglobulintest.
  • det upptäcktes av Coombs, Mourant och Race 1945 ursprungligen för detektering av ofullständiga anti-Rh-antikroppar.
  • i testet agglutinerar inte ofullständiga antikroppar erytrocyter. Ofullständig antikroppsantiglobulinbeläggning ytan av erytrocyter men orsakar ingen agglutination.
  • när sådana erytrocyter behandlas med antiglobulin eller Coombs serum agglutineras cellerna.
  • Coombs Serum eller Coombs reagens är ett speciellt serum från en kanin eller annat djur som tidigare immuniserats med renat humant globulin för att förbereda antikroppar riktade mot IgG och komplement (t.ex. kaninantiserum mot humant globulin).
  • det används i direkta och indirekta Coombs test och kallas även antihuman globulin.

mål för Coombs Test

för att detektera röda blodkroppar sensibiliserade med IgG-alloantikroppar, IGG-autoantikroppar eller komplementkomponenter.

princip för Coombs Test

under vissa förhållanden, komplementproteiner eller mer vanligt, ofullständiga antikroppar (IgG) fäster vid Röda cellmembran av Fab-delen av immunoglobulinet. Dessa celler sägs vara sensibiliserade. Sensibilisering av röda blodkroppar kan förekomma in vivo eller vitro. IgG-molekylerna som är fästa vid de röda cellerna kan inte överbrygga klyftan mellan sensibiliserade röda blodkroppar som separeras från varandra genom den negativa laddningen på deras yta och som ett resultat av vilka de sensibiliserade röda cellerna inte agglutinerar.

tillsats av Coombs reagens (antiglobulinserum) fullbordar emellertid reaktionen. När serumet tillsätts till de sensibiliserade cellerna reagerar Fab-delen av den anti-humana globulinmolekylen (anti-IgG) med Fc-delarna av två intilliggande IGG-molekyler fästa vid röda celler och överbryggar därmed klyftan mellan sensibiliserade röda celler och orsakar agglutination.

således, om human IgG-antikropp redan har fäst vid patientens röda blodkroppar in vivo (i blodomloppet), eller om patientserumet innehåller ofullständiga antikroppar som kan fästa vid RBC in vitro, kommer tillsatsen av anti-humant IgG att få cellerna att agglutinera. Detta är ett positivt Coombs test.

typer av Coombs Test

det finns två typer av Coombs-test: det direkta Coombs-testet och det indirekta Coombs-testet.

direkt Coombs Test (direkt antiglobulintest)

  • det direkta testet är vanligare och kontrollerar antikroppar som är fästa på ytan av röda blodkroppar.
  • i detta test sker sensibiliseringen av röda blodkroppar (RBC) med ofullständiga antikroppar in vivo.
  • de cellbundna antikropparna kan detekteras genom detta test där antiserum mot humant immunoglobulin används för att agglutinera patientens röda blodkroppar.

indirekt Coombs Test (indirekt antiglobulintest)

  • det indirekta testet kontrollerar för obundna antikroppar som flyter i blodomloppet.
  • i detta test sker sensibiliseringen av RBC med ofullständiga antikroppar in vitro.
  • patientens serum blandas med normala röda blodkroppar och antiserum till humant immunoglobulin tillsätts. Agglutination uppstår om antikroppar finns i patientens serum.

krav för Coombs Test

provrör, centrifug, anti-humant globulin (AHG) reagens, försensibiliserade röda blodkroppar (Coombs kontrollceller), saltlösning.

förfarande för Coombs Test

användningen av antihuman globulinserum för att detektera sensibilisering av röda blodkroppar in vitro är en tvåstegsteknik utgör indirekt antiglobulintest (IAT). Å andra sidan detekteras sensibilisering av röda blodkroppar in vivo med en stegteknik – det direkta antiglobulintestet (DAT).

direkt Coombs Test

  1. röda blodkroppar som misstänks vara sensibiliserade tvättas 3 till 4 gånger i stor volym saltlösning.
  2. två droppar anti-humant globulinserum tillsätts till de sedimenterade cellerna.
  3. den blandas väl och centrifugeras vid 1500 rpm i en minut.
  4. Agglutination undersöks genom att hålla mot en upplyst bakgrund och knacka på rörets botten.
  5. om agglutinationen inte ses, lämnas röret vid rumstemperatur i 10 minuter. sedan centrifugeras och läses. En svagare reagerande antikropp kan visa fördröjd reaktion och detta anses vara positivt.
  6. om hemagglutination inte ses i steg 5 tillsätts en droppe presensibiliserade röda blodkroppar (5% suspension är saltlösning). Detta bör resultera i hemagglutination av pre-sensibiliserade celler som indikerar att ANTIHUMAN globulin (AHG) är reaktivt och resultatet är giltigt.

indirekt Coombs Test

  1. 4% saltlösning av testcellerna framställs.
  2. två droppar cellsuspension läggs till ett litet provrör.
  3. två droppar antiserum tillsätts till cellsuspensionen.
  4. den inkuberas i ett vattenbad vid 37 kcal C i 30 min.
  5. röret från vattenbadet avlägsnas och tvättas 3 till 4 gånger med stor volym saltlösning. Det är helt dekanterat efter sista tvätten.
  6. två droppar anti human globulin (AHG) tillsätts omedelbart och blandas väl.
  7. den centrifugeras vid 1500 rpm i en minut och undersöks för hemagglutination.
  8. vid negativ hemagglutination tillsätts försensibiliserade reagensceller för att testa AHG: s reaktivitet. Agglutination måste ses med tillsats av Coombs kontrollceller.

Resultattolkning av Coombs Test

Resultattolkning av Coombs Test

positiv: en klumpning av de röda blodkropparna (agglutination) under testet.

Agglutination av blodkroppar under ett direkt Coombs test antyder att antikroppar kan finnas på patientens röda blodkroppar och att tillståndet för hemolys kan bestå.

Agglutination av blodkroppar under ett indirekt Coombs test antyder närvaron av antikroppar som cirkulerar i blodomloppet som kan få immunsystemet att reagera på alla röda blodkroppar som anses vara främmande för kroppen — särskilt de som kan vara närvarande under en blodtransfusion.

negativ: ingen klumpning eller agglutination av röda blodkroppar.

tillämpningar av Coombs Test

  1. Coombs test är ett av de blodprov som används för att ta reda på vilken typ av anemi en anemisk patient lider av.
  2. indirekt test administreras för att avgöra om det fanns en potentiell dålig reaktion på en blodtransfusion.
  3. blodbanker använder det indirekta Coombs-testet för att avgöra om det sannolikt kommer att finnas en negativ reaktion på blod som ska transfuseras.
  4. Coombs tester används för detektion av anti-Rh-antikroppar.
  5. det används också för att detektera ofullständiga antikroppar i brucellos och andra sjukdomar.
  6. det indirekta Coombs-testet används vid prenatal testning av gravida kvinnor.
  7. testet görs på det nyfödda blodprovet, vanligtvis i inställningen av en nyfödd med gulsot.
  8. det hjälper till att upptäcka tillstånd som hemolytisk anemi, kronisk lymfocytisk leukemi, erytroblastos fetalis, infektiös mononukleos, mykoplasmal infektion, syfilis, systemisk lupus erythematosus etc.

begränsningar av Coombs Test

  • ibland, särskilt hos äldre vuxna, kommer ett Coombs test att ha ett onormalt resultat även utan någon annan sjukdom eller riskfaktorer.
  • testet kan endast sällan användas för att diagnostisera ett medicinskt tillstånd.
  1. http://www.shareyouressays.com/knowledge/useful-notes-on-coombs-test/115418
  2. Coombs, Rr; Sörjande, Ae; Ras, Rr (1945). “Ett nytt test för detektering av svaga och ofullständiga Rh-agglutininer”. British journal of experimental pathology. 26: 255–66.
  3. Lydyard, p. m., Whelan, A.,& Fanger, M. W. (2005).Immunologi (2 ed.).London: BIOS vetenskapliga Förlag.
  4. Parija S. C. (2012). Lärobok i mikrobiologi & immunologi.(2 utgåva.). Indien: Elsevier Indien.
  5. Sastry A. S. & Bhat S. K. (2016). Essentials av medicinsk mikrobiologi. New Delhi: Jaypee Brothers Medicinska Förlag.

Lämna ett svar

Din e-postadress kommer inte publiceras.